教您如何正確對液相色譜柱使用緩沖鹽？
更新時間：2021-06-23 點擊次數：2621次
液相色譜柱在使用前，先進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行，只有這樣，測得的結果才有可比性。
本產品可適用范圍廣，從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離，在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學，生藥學和天然產物化學，生物物質如多肽、蛋白、核酸等多個領域發揮重要作用。
液相色譜柱正確使用緩沖鹽：
緩沖鹽通常易溶于水，難溶于有機溶劑，因此緩沖鹽使用不當會使其析出，堵塞填料基質上的微孔和顆粒間的空隙，使填料板結，柱壓上升；同時阻礙了基質上鍵合的碳鏈自由舒展，使色譜柱的保留能力下降，柱效降低。緩沖鹽析出后，去除非常困難，因此，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要。
正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話：使用前要過濾，使用后要沖洗。具體方法如下：
1、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1、0ml/min流速沖洗60min；使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0、2ml/min流速沖洗色譜柱過夜。
2、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1、0ml/min流速沖洗60min，再用該過渡流動相以1、0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設定應盡量平緩，以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
3、緩沖鹽析出的補救方法：
a、用甲醇/20/80以1、0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
b、用甲醇/水=20/80以0、2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。
在線咨詢